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        豬肺消化液卵黃培養基



        錄入時間:2022-1-20 14:42:18 來源:現代微生物培養基和試劑手冊

        【原理】

          豬肺消化液含有支原體生長所需的某些基本營養成分,可代替馬丁氏培養基中的豬胃和牛肉浸液;卵黃液與馬血清比較,膽固醇、脂蛋白、磷脂等支原體生長促進因子含量更高,而蛋白質含量甚低,以卵黃液作為支原體培作基的添加成分,具有成本低、取材容易、促進生長作用更等優點,而且用于抗原制備時還能減少由支體原吸附蛋白質產生的抗原的非特異性。


        【成分】

        豬肺消化液
        800ml
        卵黃液
        100ml
        100000u/ml青霉素G
        5ml
        酵母浸液
        100ml
        50%葡萄糖
        20ml
        0.4%酚紅
        5ml

        【制法】

          (1)豬肺消化液的制備:鮮豬肺250g,絞碎后加入蒸餾水1000ml,濃鹽酸2ml,胃蛋白酶2g,56℃水浴15小時,沸水浴10分鐘終止消化,脫脂棉過濾,加蛋白10g, Tris 1g,調至pH7.8,沸水浴15分鐘,冷卻后濾紙過濾,121℃滅菌15分鐘,冷卻后備用;

          (2)卵黃液的制備:新鮮雞蛋洗凈蛋殼,75%酒精浸泡15分鐘,無菌操作取出卵黃,加玻璃珠搖成勻漿,以pH7.8PBS配成20%(V/V)之懸液,8000rpm離心1小時,取上清液,加青霉素500u/ml,無菌試驗檢查后分裝備用;

          (3)酵母浸液的制備:鮮酵母500g,加蒸餾水1500ml,充分攪拌,80~90℃水浴20分鐘,冷卻后,8000rpm離心20分鐘,取上清液以1molL氫氧化鈉調節至pH7.8,再以450nm濾膜除菌過濾,分裝備用;

          (4)上述成分按比例混合,加入其余無菌添加成分,最終pH7.8。


        【用途】

          分離各種人支原體及實驗室制備支原體抗原。


        【注意事項】

          1.豬肺須優質、新鮮,雞蛋須新鮮、無污染。

          2.豬肺消化液、卵黃液4℃保存,酵母浸液-20℃保存。

          3.用于肺炎支原體培養時加葡萄糖,而其他人類支原體培養改加0.1%精氨酸。

        (第二軍醫大學長征醫院 俞康龍供稿)

         

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